簡(jiǎn)稱胰酶EDTA消化液

液體,2.5g 豬胰蛋白酶和0.2g EDTA溶于1升PBS。不含鈣和鎂。-20℃保存, 過(guò)濾除菌，-20℃保存

此試劑使用前，可適當(dāng)分裝一下，使用時(shí)，是預(yù)熱到37度，鏡下控制消化時(shí)間。

胰蛋白酶細(xì)胞消化液使用說(shuō)明

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
我們生產(chǎn)的胰蛋白酶消化液一共有三種，分為胰蛋白酶－EDTA消化液（不含酚紅）；胰蛋白酶－EDTA消化液（含酚紅）；胰蛋白酶消化液（不含酚紅），可根據(jù)客戶的需要來(lái)選擇。
其中，胰蛋白酶含量為0.25%（2.5g/L），EDTA含量為0.02%(0.2g/L)。PBS為常用的不含鈣鎂的細(xì)胞培養(yǎng)用PBS。經(jīng)無(wú)菌過(guò)濾，可直接使用。

保存條件：
-20℃保存，一年有效?？蛻羰盏疆a(chǎn)品后，可以適當(dāng)?shù)姆盅b后凍存，每次取一支出來(lái)使用。

注意事項(xiàng)：
1.         在分裝胰蛋白酶-DETA消化液的過(guò)程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
2.         胰蛋白酶-DETA消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。
3.         為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說(shuō)明：
1. 貼壁細(xì)胞的消化：
a) 吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
b) 加入少量消化液，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置30秒至2分鐘或者更長(zhǎng)時(shí)間。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同，必要時(shí)可放37℃消化。
c) 顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)。此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。
e) 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2. 組織的消化：
不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。