MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

MTT檢測試劑盒采用MTT經(jīng)典的方法。其實老師可能自己配制，而買現(xiàn)成的，主要是圖個省事。

MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒（MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）被廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan。在特定溶劑存在的情況下，可以被*溶解。然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快，則吸光度越高；細胞毒性越大，則吸光度越低。

使用說明：

1. MTT溶液拿出解凍。DMSO常溫存放，如果室溫過低（DMSO在20度以下會結冰），可放37度預熱解凍。
2. 通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定)。按照實驗需要，進行培養(yǎng)并給予0-10微升特定的藥物刺激。
3. 每孔加入10微升MTT溶液，在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育4小時。
4. 每孔加入100微升DMSO，在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育。直至全部溶解。通常37℃孵育4小時左右，紫色結晶會全部溶解。如果紫色結晶較小較少，溶解的時間會短一些。如果紫色結晶較大較多，溶解的時間會長一些。
5. 在570nm測定吸光度。如無570nm濾光片，可以使用560-600nm的濾光片。

有些實驗室條件不足，沒有酶標儀，聽說用分光光度計來測，理論上沒什么不可以。但肯定得是用微孔比色皿，速度快一點。

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