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SABC(山羊IgG)-FITC免疫組化試劑盒

SABC(山羊IgG)-FITC免疫組化試劑盒

簡要描述:貨  號:A0190
名  稱:SABC(山羊IgG)-FITC免疫組化試劑盒
規(guī)  格:100T
價(jià)  格:750.00

產(chǎn)品型號:

所屬分類:其他自產(chǎn)即用試劑

更新時(shí)間:2025-02-21

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

詳情介紹

SABC(山羊IgG)-FITC說明書

免疫組化試劑盒

 

 試劑盒組成:

1,  封閉液:10ml,5%BSA

2,  Bio-兔抗山羊:濃縮液100ul。

3,  SABC-FITC:濃縮液100ul。

4,  稀釋液:30ml。

5,  抗熒光衰減封片劑

 

試劑盒簡介:

本試劑盒適合于一抗為山羊IgG的免疫組化實(shí)驗(yàn). FITC顯色。

SABC是專為免疫組化和其他免疫檢測而設(shè)計(jì)的,用以顯示組織和細(xì)胞中抗原分布。鏈霉親和素(StreptAvidin)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì),同親和素一樣,對生物素有*的親和力,親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)(IP=10),經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性,對組織和細(xì)胞的非特異吸附很低,基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大約可形成一百個(gè)左右的過氧化物酶和五十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。大量的酶將保證SABC具有很高的敏感性。

自備試劑:

1.粘片劑多聚賴氨酸。

2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)

3. 0.01M檸檬酸鈉緩沖液

4、抗熒光衰減封片劑

 實(shí)驗(yàn)步驟:

以石蠟切片熱修復(fù)為例

1. 切片常規(guī)脫蠟至水。

2.熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M 枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0),電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔5-10分鐘后,反復(fù)1-2次。冷卻后PBS(pH7.2-7.6)洗滌1-2次。

3.滴加5%BSA封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體, 不洗。

4.用稀釋液將一抗(如山羊抗IL-10)按一定比例稀釋(稀釋后的一抗4℃可保存一周),也可另行購買抗體稀釋液。滴加稀釋的一抗,37 ℃ 1小時(shí)左右或20℃時(shí)2小時(shí)左右。也可4℃過ye。PBS(pH7.2-7.4)洗2分鐘×3次。(一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說,陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí),可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時(shí)間;背景過高時(shí),可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。)

5.根據(jù)使用量,用稀釋液將生物素化羊抗山羊IgG濃縮液按1:100稀釋成工作液(1ml稀釋液加入10ulBio-兔抗山羊IgG濃縮液,混勻即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗山羊IgG工作液,20-37℃ 30分鐘。PBS(pH7.2-7.4)洗2分鐘×3次。

6.根據(jù)使用量,用稀釋液將SABC-FITC濃縮液按1:100稀釋成工作液(1ml稀釋液加入10ul SABC-FITC濃縮液,混勻即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分鐘(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗5分鐘×4次。

7.滴加抗熒光衰減封片劑封片。熒光顯微鏡觀察。

 

注意事項(xiàng):如果染色背景過高,在SABC反應(yīng)之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗滌切片4次,PBS洗2次,然后封片觀察。



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